最早確定李奧納對解剖學產生興趣的素描筆記於十五世紀八〇年代末。這些素描筆記是他影響最為深遠的一就的開端。就他的實際貢獻或影響力來說，他在解剖學方面取的績遠於他在工程、發明建築方面的績。他繪製的人體圖記錄的相關筆記比前人在這方面的就更為嚴格準確。他的人體解剖素描為揭示人體器官提供了全新的視圖，就像他的機械素描與機器的關係一樣。進行這種探索需頑強的意志勇氣，會受傳統禁忌的阻礙教條主義者的質疑，且還需在屍體冷卻前在緊張的時間內，進行令人厭惡的解剖。李奧納的解剖活動體現了他「勇於實踐」的工理念，這是對先哲——加倫、希波克拉底亞斯德被普遍接受的智慧的剖析再評價，這三人當時依是醫學派別的主流。
傳統觀念認為解剖學太過古怪，因為人是按照帝的樣子生來的，因此不像機器那樣被卸八塊。早期的人文主義者科盧切．薩盧塔蒂就曾寫，解剖學揭示了「所一直精隱藏的東西」，「我不相信果在人體深處的時候，有人不潸淚。」李奧納的解剖活動至少有一次使己與教會發生過對立。那是一五一五年的羅馬，一個居……（内容加载失败！）
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